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凯氏定氮法蛋白质含量计算公式(凯氏定氮法)

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1、原发布者:ka7m97

2、凯氏定氮法-原理凯氏定氮法-原理样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出,而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏,使氨蒸出,用硼酸吸收后再以标准盐酸或硫酸溶液滴定。根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。2NH2(CH)2COOH+13H2SO4=(NH4)2SO4+6CO2+12SO2+6H2O浓硫酸具有脱水性,使有机物脱水后被炭化为碳、氢、氮2H2SO4+C=2SO2+2H2O+CO2浓硫酸又具有氧化性,将有机物炭化后的碳化为二氧化碳,硫酸则被还原成二氧化硫二氧化硫使氮还原为氨,本身则被氧化为三氧化硫,氨随之与硫酸作用生成硫酸铵留在酸性溶液中。H2SO4+2NH3=(NH4)2SO4②蒸馏在消化完全的样品溶液中加入浓氢氧化钠使呈碱性,加热蒸馏,即可释放出氨气,反应方程式如下:2NaOH+(NH4)2SO4=2NH3(气体)+Na2SO4+2H2O③吸收与滴定加热蒸馏所放出的氨,可用硼酸溶液进行吸收,待吸收完全后,再用盐酸标准溶液滴定,因硼酸呈微弱酸性(k=5.8×10-10),用酸滴定不影响指示剂的变色反应,但它有吸收氨的作用,吸收及滴定的反应方程式如下:2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3硫酸钾的作用:加入硫酸钾可以提高溶液的沸点而加快有机物的分解,它与硫酸钾作用生成硫酸氢钾可提高反应温度其反应式如下:K2SO4+H2SO4=2KHSO42KHSO4=K2SO4+H2O(气体)+SO3一般纯硫酸

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